Laboratorio/Ematossilina eosina

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La colorazione con ematossilina eosina è la colorazione di base per lo studio della istologia animale.

Indice 1 Materiale 2 Protocollo 2.1 Idratazione 2.2 Ematossilina 2.3 Eosina 2.4 Disidratazione

[modifica] Materiale

• vetrino con una sezione non colorata
• vetrino coprioggetto
• un supporto per vetrini con manico lungo almeno 5-10 cm
• 10 vaschette di vetro la cui dimensione sia compatibile con quella del portavetrini
  • 7 di queste andranno a formare la scala di idratazione/deidratazione
  • una serve per l'ematossilina
  • una per l'eosina
  • una per i lavaggi
• xilene, 2 vaschette
• etanolo assoluto, 2 vaschette
• etanolo 90°, 2 vaschette
• Emallume di Mayer (Ematossilina)
• Soluzione alcoolica di eosina
• acqua distillata 1 litro

[modifica] Protocollo

[modifica] Idratazione

Mettere il vetrino in stufa 60°C fino a quando la paraffina non è diventata liquida.

Dopodiché si immerge:

1. 20 minuti in xilene 1
2. 15 min in xilene 2
3. 10 min in etanolo assoluto 1
4. 10 min etanolo assoluto 2
5. 5 min in etanolo 90° 1
6. 5 min in etanolo 90° 2
7. 20 min i acqua distillata

[modifica] Ematossilina

1. immergere i vetrini 20 secondi nel colorante
2. lavare in acqua distillata 2 volte
3. mettere la vaschetta con i vetrini sotto l'acqua corrente di rubinetto per 5 min, possibilmente senza dirigere il getto diretamente sulle sezioni
4. lavare in acqua distillata

[modifica] Eosina

1. immergere il portavetrini nel la vaschetta con l'alcool 90° per 15 min
2. immergere i vetrini nell'eosina per 1 minuto
3. metterli poi nella vaschetta dei lavaggi piena di alcool 90°

[modifica] Disidratazione

1. Continuare con gli acooli e lo xilene, ed infine mettere una goccia di balsamo montante ed apporre il vetrino coprioggetto.
2. Fare asciugare su carta bibula in stufa a 60 C°